جداسازی سرم و پلاسما و سلول های تک هسته ای از خون محیطی و تهیه رقت های پیاپی

 

نوع فایل: PowerPoint

تعداد اسلاید (ها): 98

 

توضیحات:

یکی از قابل دسترس ترین نمونه هایی که در آزمایشگاه ایمنی شناسی مورد استفاده قرار می گیرد خون است. بسیاری از آزمایشات ایمنی شناسی بر روی پلاسما یا سرم قابل انجام است و بعضی دیگر از آزمایشات بر روی رده های خاصی از سلول های خونی انجام می گیرند.

پزشک درخواست کننده آزمایش باید اطلاعاتی در مورد نوع و مقدار زمان نمونه گیری داشته باشد. بعضی از آزمایش ها نیاز به خون تازه است، در حالیکه در بعضی از آزمایش ها نگهداری خون به مدت چند ساعت نیز اختلالی در نتیجه آزمایش ایجاد نمی کند. بعضی از آزمایش ها نیاز به خون استریل دارند و در بعضی از آنها خون باید با ماده ضد انعقاد ویژه ای مخلوط شود.

سرم:

● اکثرا آزمایش های سرولوژی بر روی سرم انجام می شود مانند اندازه گیری ایمونوگلبولین ها و اجزا کمپلمان، بررسی فعالیت کمپلمان، اندازه گیری شاخص های توموری مانند(CEA. AFP, PSA ) و اندازه گیری آنتی بادی بر علیه عوامل عفونی

● برای جداسازی سرم باید خون را پس از لخته شدن سانترفیوژ کردو سرم جدا شده یا فورا باید مورد آزمایش قرار گیرد و یا پس از جداسازی در یک لوله تمیز ریخته شود. مشخصات بیمار بر روی آن نوشته شود و در دمای 20- درجه سانتیگراد تا 70- درجه سانتیگراد نگهداری شود.

● Prostatic Specific Antigen

Alpa-Fito protein ●

● Carcino Embryonic Antigen

پلاسما:

● بسیاری از آزمایشهای سرولوژی بر روی پلاسما نیز قابل انجام است.

● برای جداسازی پلاسما، خون بلافاصله پس از خروج از رگ باید ماده ضد انعقاد (هپارین-اگزالات یا EDTA ) مخلوط شود. این مواد از انعقاد خون جلوگیری می کنند. اگر چنین نمونه ای سانترفیوژ شود سلول های خون از پلاسما جدا می شوند.

● پلاسما برخلاف سرم حاوی فیبرینوژن می باشد. گلبول های قرمز در ته لوله قرار میگیرند و گلبول های سفید به صورت یک لایه بر روی آنها قرار می گیرند به این لایه Buffy coat می گویند.

● پلاسما بر روی سلول ها قرار می گیرد که می توان آن را جدا کرد و در فریزر نگهداری نمود.

● از Buffy coat نیز می توان در بعضی از آزمایش ها از جمله Nitro Blue Tetrazolium test (NBT) که به منظور بررسی فعالیت نوتروفیل ها انجام می شود استفاده کرد. خون بافتی است که در یک مسیر بسته عروقی دائماً در گردش است و 7 تا 9% وزن بدن انسان را تشکیل می دهد

● وزن مخصوص خون 1/05 -1/03 و ویسکوزیته آن حدود چهار برابر آب است.

●عناصری که خون را تشکیل می دهند عبارتند از : گلبول سرخ (Erythrocyte) و گلبول سفید( Leukocyte W.B.C.) ، پلاکت (Platelet یا Thrombocyte).

● خون محتوی مایعات خارج سلولی (پلاسما) و داخل سلولی (مایع موجود در داخل گلبول ها) می باشد.

● پلاسما مایع شفاف متمایل به زرد و نسبتاً چسبناکی است که هنگام سانتریفوژ خون، در سطح قرار می گیرد .

● پلاسما بخش آبکی خون است و حاوی بیش از 90 درصد آب است.

● 10 درصد دیگر پلاسما را مواد محلول تشکیل می دهد که شامل پروتئین های پلاسما (7درصد)، نمک های غیر آلی و چندین ترکیب آلی مانند اسید های آمینه، ویتامین ها، هورمون ها و لیپوپروتئین ها (لیپید+پروتئین) است. سلول های خونی چه هستند؟

● حدود 45 تا 55 درصد حجم کل خون را سلول های خونی تشکیل می دهند.

● سلول های خونی شامل گلبول های قرمز (اریتروسیت ها)، گلبول های سفید (لکوسیت ها) و پلاکت ها است.

● هنگامی که اجزای خون به وسیله دستگاه سانتریفوژ از هم جدا می شوند، گلبول های قرمز در پایین ترین لایه قرار می گیرند (این لایه قرمز رنگ است و 42 تا 47 درصد حجم کل خون را تشکیل می دهد).

● لایه ای که بلافاصله روی آن قرار می گیرد به رنگ سفید یا خاکستری است و از گلبول های سفید تشکیل شده است. لایه نازکی از پلاکت ها که با چشم غیر مسلح قابل تشخیص نیست، گلبول های سفید را می پوشاند.

جداسازی سلول های تک هسته ای خون:

● برای انجام آزمایشاتی مانند: Mixed lymphocyte culture (MLC) و Lymphocyte transformation test (LTT) و HLA-typing و WBC cross match از لنفوسیت های خون محیطی استفاده می شود.

● برای جدا کردن لنفوسیت ها از ماده ای به نام Ficoll hypaque با دانسیته 1.077استفاده می شود.

● دانسیته سلول های تک هسته ای خون محیطی بر خلاف گلبول های قرمز و گرانولوسیت ها کمتر از فایکول می باشد.

● بنابراین با انجام سانترفیوژ بر روی فایکول می توان آنها را براحتی جدا نمود.

فهرست مطالب:

عنوان

سرم

پلاسما

سلول های خونی چه هستند؟

جداسازی سلول های تک هسته ای خون

peripheral blood mononuclear cell (PBMC)

رقیق سازی سرم و اهمیت آن در آزمایش های سرولوژی

روش ساده

روش کار

جداسازی پلاسما

جداسازی

سرم

تست تشخیص C-Reactive Protein" CRP”

مثال هایی از افزایش CRP در سرم شامل

تست تشخیص RF ( Rheumatoid factor)

رماتیسم چیست؟

علائم روماتیسم مفصلی چیست؟

علایم مفصلی

مهمترین معیارهای تشخیص روماتیسم مفصلی

بروسلوز( Brucellosis)

تشخیص بیماری به دو صورت انجام می گیرد

روش انجام آزمایش رزبنگال

2.روش انجام آزمایش رایت (Wright test ) یا (SAT = standard Agglutination)

آزمایش تشخیص کلاس آنتی بادی ضد بروسلا(2ME-Wright test)

روش آزمایش 2ME-Wright

آزمایش کومبز-رایت

روش انجام تست کومبز-رایت

آزمایش رایت سانترفیوژ (Wright Centrifuge) سالمونلوز Salmonellose

تشخیص بیماری

تست های سرولوژیک

تفسیر نتایج

تشخیص عفونتهای استرپتوکوکی

گلودرد استرپتوکوکی (20 تا 40 % فارنژیت اگزوداتیو)

توکسین ها و آنزیمهایی که توسط استرپتوکوکهای گروه A ترشح می‌گردند عبارتند از

استرپتوکوکهای پیوژن گروه A لانسفیلد

تشخیص آزمایشگاهی تب روماتیسمی

تشخیص آزمایشگاهی گلومرو لونفریت حاد» آزمایش آنتی استرپتولیزین O(ASO)»

از لحاظ علائم بالینی، بیماری سیفلیس را به سه مرحله تقسیم نموده اند

مرحله اولیه(Primary) سیفلیس

مرحله ثانویه (Secondary) سیفلیس

مرحله سوم (Tertiary ) سیفلیس

آزمایشات سرولوژی برای تشخیص بیماری سیفلیس

رآژین سیفلیسی

مزیت RPR نسبت به VDRL این است

آنتی بادی غیراختصاصی ضد میکروب های گروه تروپونما

آنتی بادی اختصاصی تروپونما

واکنش‌های آنتی‌ژن-آنتی‌بادی را به سه دسته تقسیم می‌نمایند

انواع آنتی ژن ها یا ایمنوژن ها

تست توبركولين

انواع محلول PPD بر حسب قدرت آنتى ژن

ضوابط نگهدارى و مصرف صحيح ماده توبركولين

نحوه انجام تست پوستى توبركولين

کنترل محل تزریق

پایان

 

 

 

 

 

فروشگاه آنلاين محصولات دانلودی

پشتیبانی خرید:

09337266852